关于门徒娱乐
热门核酸门徒娱乐种类- ASOsiRNA mRNA Aptamer
- 核酸门徒娱乐的优势核酸门徒娱乐基于碱基序列快速直观的设计，利用简单的制备原料和工艺，可负担的生产成本，让门徒娱乐研发的周期大幅缩短，让门徒娱乐定制或个性化治疗方案成为可能，使罕见病等困扰目前医药行业的棘手问题得以解决。
- 核酸门徒娱乐合成&修饰
合成
◆ 核苷酸单体合成
◆ 寡核苷酸合成
◆ 递送系统合成
◆ 寡核苷酸偶联物合成
修饰
◆ 糖修饰
◆ 碱基修饰
◆ 骨架修饰
◆ 递送系统修饰
- 生物活性评价◆ siRNA-GALNAc与靶向肝细胞的结合评估（ELISA,SPR,FP,FACS,MSD,Confocal 显微镜）◆ 靶标mRNA/蛋白质水平降低评估（RT/Q-PCR,Western blot)◆ 细胞表型和功能性干扰的评估（细胞增殖，迁移，蛋白质修饰和互作）
◆ 脱靶效应评估◆ 在数据库寻找潜在的脱靶off-target mRNA和蛋白（数据库如NCBI/nucleotide BLAST)◆总体分析脱靶现象(RNAseq or RNA Microarray)
- 核酸门徒娱乐工艺开发起始物料选择：易采购、低毒性、质量稳定的原辅料和试剂选择；核酸工艺开发：低成本、高安全性、质量稳定的绿色生产工艺；质量控制：先进的质量控制体系，完善的质控技术标准；工艺放大：端到端深度对接，平稳转移。
核酸门徒娱乐制剂服务- 脂质及其衍生物凭借其低免疫原性、生物相容性及对寡核苷酸分子较高的包封率成为近年来备受关注的核酸门徒娱乐的新型递送系统，系统中的脂质可以在生理环境下带有正电荷，通过静电作用将带有负电荷的核酸分子包裹起来，并帮助整个载体系统与靶细胞的细胞膜相结合，从而起到递送作用。
图片来源：Science China Life Sciences volume 62,pages333-348(2019)
- 常见脂质递送系统
- 门徒娱乐常用纳米粒子制备方法
- 成功RNA递送系统的特征递送系统的设计依靠化学修饰手段可以实现，合成途径不复杂，便于生产；有靶向的递送，递送的靶向和脱靶比率要在可接受的范围。靶向和脱靶递送需要同时使用生物分布和功能化指标来衡量，因为95%的RNA可能被保留在内体(endosome)中，生物分布并不见得能够预测RNA的功能性递送。产生疗效的RNA剂量必须显著低于可能产生毒性的剂量；门徒娱乐的活性应该在不同批次之间保持一致;在大多数临床环境下，重复给药不会导致疗效或安全性的丧失。
- 门徒娱乐纳米递送系统研究体系
核酸-脂质系统研究 • 处方：药脂比研究、溶剂筛选、水相：有机溶剂比例研究等；
• 工艺：制备方法；
• 稳定性：溶液状态初步稳定性；
• 剂型筛选。
核酸门徒娱乐生物分析
药代、毒代分析 • 分子杂交-酶联分析（H-ELISA) LC-MS/MS ；
• 分子杂交-电化学发光分析（H-ECL）；
• 反转录荧光定量PCR（RT-qPCR）；
• 定量PCR(qPCR)；
• 数字微滴PCR(ddPCR)。
免疫原性分析 • 总抗门徒娱乐抗体即ADA分析 ；
• MSD ；
• 中和抗体（Nab)分析：CLBA or Cell-based Assay。
PD或TOX相关细胞因子和生物标志物 Cytokine&Biomarker(细胞因子或生物标志物）
• Singleplex（基于各种LBA技术）；
• Multiplex(Luminex、MSD、FACS CBA技术）；
• FACS。
生物分析三大技术平台- LC-MS/MS/HRMS技术平台
高特异性灵敏度：可达ng级别优势：可监测代谢产物 - Hybridization-EIA/ECL技术平台
高特异性灵敏度：可达1个log级别内的拷贝数优势：更灵敏 - qPCR/ddPCR技术平台灵敏度：可达pM级优势：多变的标记测略、个性化的反应策略
核酸门徒娱乐药效学评价- ◆ 不同用药途径的比较（如静脉注射，瘤内局部注射）◆ 体内药效与靶标mRNA/蛋白质降解（PD）和寡核苷酸门徒娱乐的系统暴露量（PK）的相关性分析
• Animals: Female BALB/c Nude mice；
• Cells: MDA-MB-231, 5*106/mouse；
• Model Establishment: Right flank SC injection；
• Treatment: IV injection;
TIW (three times a week);
Group3, 4: mRNA (LNP)group.
• Animals: Female BALB/c Nude mice；
• Cells: MDA-MB-231, 5*106/mouse；
• Model Establishment: Right flank SC injection；
• Treatment: Intratumor in-jection;
TIW (three times aweek);
Group 7, 8: mRNA(LNP) group.
◆ 脂质纳米粒（Dendrimer LNP）◆ (递送和NIR影像，Luc mRNA;Ⅳ and intra-tumoral)
◆ 外泌体（CNP-generated exosome)◆ （脑胶质瘤导向外泌体Exo-T递送PTEN mRNA,IV）
- 同源小鼠模型
Cancer Type Cell Lines Bladder Cancer MB49 Brain Cancer G261 Breast Cancer 4T1, EMT6, JC,EO771 Colon Cancer CT26.WT, MC-38, Colon26 Leukemia C1498, L1210, WEHI-3 Liver cancer H22, Hepa 1-6 Lung Cancer LLC1, KLN205 Lymphoma A20, EL4, L5178-R, E.G7-OVA Mastocytoma P815 Melanoma B16-F10, Clone-M3 Myeloma J558 Pancreas Cancer Panc 02 Renal Cancer RENCA Luciferase Cell Line G261-luc, 4T1-luc, Mc38-luc, H22-luc, B16-F10-luc, LLC1-luc - 人源化小鼠模型
Cancer Type Cell Lines in PBMC or HSC CD34+ Humanized Mice Brain Cancer U-87 MG Breast Cancer HCC1954, MDA-MB-231, JIMT-1 Colon Cancer HT29, LoVo, Ls174T, HT-15 Gastric Cancer NCI-N87, NUGC-4 Leukemia THP-1 Lung Cancer HCC827, NCI-H1975, NCI-H292, A549 Lymphoma Raji, TMD8, MOLM-13 Melanoma A375 Myeloma RPMI-8226, NCI-H929, MM.1S Ovarian Cancer OVCAR-3 Pancreatic Cancer Capan-2 Renal Cancer 786-O Skin Cancer A431 2022年7月8日线上研讨会《助力扬帆，核酸门徒娱乐新时代启航》是你核酸门徒娱乐研发前行路上不可错过的可靠向导。这是一场干货满满的知识盛宴，是一场关乎核酸门徒娱乐未来的头脑风暴，更是一场值得每一位医药人士参与的惊喜约“会”，快来观看视频回放吧。
